細胞培養的being之旅
2023-07-03 | 文章來源: | 點擊率:
細胞是生物學領域研究的重要材料,而細胞培養是指在體外提供穩定的培養環境使細胞健康生長、穩定繁殖的方法。
細胞的培養流程并不復雜,但有人形容說,細胞培養需要像關心孩子一樣,否則稍不留神就“鬧點脾氣”:細胞污染、活力不佳,或漸漸就不是原來的樣子。
我們要講是,細胞培養的being之旅。
準備工作
無菌操作是細胞培養成功的關鍵因素,所以須穿上隔離服或專用的白大衣,戴上一次性手套和口罩,換上專用一次性拖鞋。細胞培養操作前進行臺面、器皿消毒,務必用75%的酒精擦拭生物安全柜(being,BBC-A2系列)的操作臺面,然后將柜內紫外燈打開照射30分鐘左右進行滅菌,再開始培養操作。
細胞復蘇
細胞復蘇遵守“慢凍快融”的原則,細胞凍存管從液氮(being,BYDS系列)或超低溫冰箱(being,BDW-86L系列)中取出后,通過PE手套,迅速放入37℃水浴(being,BW系列)中輕輕搖動融化約1min。離心處理后加入培養基接種至培養瓶/培養皿中。
細胞培養
將含有細胞的培養瓶/培養皿放入CO2培養箱(being,BIO-RHP、BIO-RHP Pro系列)中,將參數調節到適當的溫度(37℃),適當的氣體濃度(CO2氣體濃度5%),在培養箱底部或放置的水盤中加入超純水保證箱體內相對應的濕度,開始細胞培養,培養過程中要定時觀察細胞培養情況。
通常情況下,細胞培養過程中發生污染后,需將污染的細胞丟棄,并對CO2培養箱進行消毒滅菌,防止污染源進一步擴散造成更大的污染。
所以保證培養環境的穩定,是細胞培養成功的重要因素。
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